叙述K-B纸片扩散法药敏试验的原理和操作.
叙述K-B纸片扩散法药敏试验的原理和操作.
发布时间：2025-06-15 23:04:41
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答案：【计分规则】: 该题主要考查K-B纸片扩散法药敏试验的操作步骤，此试验是实验室和临床检验常做的项目，熟练掌握操作步骤是基本要求。一、原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系。 二、操作步骤1.水解酪蛋白（MH）培养基，pH7.2～7.4，做成琼脂厚度4mm，直径90mm的平板，或用商品化的MH平板。2.挑取孵育18～24小时已分纯菌落，置于生理盐水管中，振荡混匀后校正浓度至0.5麦氏标准。3.用无菌棉拭子蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液。4.然后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度；最后沿平板内缘涂抹1周。5.平板在室温下干燥3～5min，用无菌镊子或商品化的纸片分配器将含药纸片紧贴于琼脂表面，各纸片中心距离应大于24mm，纸片距平板内缘大于15mm。6.35℃孵育18～24小时，量取抑菌圈直径。7.根据抑菌环的直径，按照CLSI标准判读，报告敏感、中介、耐药。答对一条可得10分。
