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革兰氏染色的主要步骤及原理。

革兰氏染色的主要步骤及原理。

发布时间:2025-06-18 14:03:02
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答案:革兰氏染色法是由丹麦的医生革兰(Gram)1884年首创的。 步骤:先用草酸铵结晶紫液染色→加碘液→细菌着色乙醇脱色→蕃红(沙黄)复染。 其中,乙醇脱色后,仍保持其初染的紫色→ G +;乙醇处理后迅速脱去原来的颜色,而染上蕃红的颜色→G-。 原理:与细菌细胞壁的化学组成和结构、细胞壁的渗透性等有关,主要是物理作用。 染色时,染料一碘复合物在细菌细胞内形成。当用95%乙醇作脱色处理时,一方面能把细胞壁中的脂类抽提出来,另一方面又使细胞壁引起脱水作用,使肽聚糖的孔径变小。 由于G-的细胞壁含脂类较多,被乙醇抽提出去后,细胞壁各层结构变得松弛,又因其肽聚糖含量较少,虽小孔也因脱水作用而缩小,但仍有足够大小的通道和较大的通透性,这样就可使染料一碘复合物能被抽提出来,形成革兰氏阴性反应。 反之,G +的细胞壁含脂类较少,肽聚糖含量高,结构紧密。经乙醇脱水后,细胞壁孔径大为缩小,通透性明显地降低,染料一碘复合物不易被抽提出来,形成革兰氏阳性反应。
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