贴壁依赖型传代细胞的培养步骤和传代细胞培养的注意事项？
贴壁依赖型传代细胞的培养步骤和传代细胞培养的注意事项？
发布时间：2024-12-17 16:59:41
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答案：步骤：1）吸去或者倾出旧培养液2）用PBS或者无钙离子、镁离子的平衡盐溶液轻缓洗培养物1-2次尽量洗去残余血清 弃平衡盐溶液3）解离细胞。常用方法是，给培养器皿内加入0.08% 0.125%或者0,25%胰蛋白酶溶液，于室温或者37 ℃条件下消化5-15分钟。对于某些容易脱壁细胞，或者某些对消化液不敏感的细胞，可以再4 ℃条件下进行消化。4）终止消化。吸去或者倾出消化液，立即加入蛋白酶抑制剂或者有血清培养液5）用弯头吸管吸取培养皿内的培养液或蛋白酶抑制剂溶液，反复吹打平皿底部，使已经消化的细胞脱离平皿低壁6）离心，除去上清液。7）用培养液将细胞沉淀重新悬浮 计数并调整细胞密度8）接种在新的培养平皿内9）送入培养箱中继续培养注意事项：1）传代时机与才培养细胞密度2）传代数或代数与培养物的生长
