如何鉴定ES细胞？
如何鉴定ES细胞？
发布时间：2025-09-03 08:52:12
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答案：【计分规则】: 答：1) 形态学检测：体外培养ES细胞不论在饲养层细胞上或缺乏饲养层而添加所需生长因子的特定条件下，细胞形态为圆形或扁圆形，均呈单层或多层密集堆积而形成岛状、巢状群体生长状态。（5分）2) 碱性磷酸酶（AKP）活性的检测：碱性磷酸酶在早期胚胎的干细胞中含量较高，而在已分化的细胞中活性明显降低。用固蓝KR或其B盐溶于萘酚AS-TR中，染色未分化干细胞后呈深蓝紫色。（5分） 3) 体内分化实验：将ES细胞悬液注射给同种动物皮下。制作切片染色可观察到畸胎瘤的形成，除大量的干细胞巢和间质细胞外，还包括神经管、腺管、上皮组织、软骨和肌肉等多类型的分化细胞。（5分）4) 体外分化实验：将ES细胞悬液培养形成囊状简单胚体或类胚体，这类细胞多为自发分化，随培养条件和细胞密度而有所不同。（5分）5) 核型分析法：检测已建立的ES细胞是否具有二倍体正常的核型，可用核型分析加以检验。（5分）6) OCT活性检测：OCT基因是小鼠胚胎发育早期生殖细胞谱系以及体外培养的多能干细胞特异性表达的一种发育多能性的标志基因。用OCT抗血清和间接免疫荧光法可检测ES和EG细胞中OCT基因的表达产物。（5分）
