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诱变育种的关键步骤有哪些?

诱变育种的关键步骤有哪些?

发布时间:2025-05-20 15:27:35
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答案:

(1)出发菌株的选择:应挑选对诱变剂敏感性大、变异幅度广、产量高的出发菌株,可以同时选取2~3株,在处理比较后,将更适合的菌株留着继续诱变。

  (2)同步培养:在诱变育种中,处理材料一般采用生理状态一 致的单倍体、单核细胞,即菌悬液的细胞应尽可能达到同步生长状态,因此细菌一般要求培养至对数生长期,此时群体生长状态比较同步,比较容易变异,重复性较好。

  (3)单细胞(或单孢子)悬液的制备:菌悬液一般可用生理盐水或缓冲溶液配制,另外应注意其分散度,保持分散度达90%以上,这样可以保证菌悬液均匀地接触诱变剂,获得较好诱变效果。  

(4)诱变处理:首先选择合适的诱变剂,其次确定诱变剂使用剂量,在诱变育种工作中,目前较倾向于采用较低剂量。可采用复合处理方法,包括两种或多种诱变剂先后使用、同一种诱变剂重复使用和两种或多种诱变剂同时使用。

(5)中间培养:刚经诱变处理过的菌株有一个 表现迟滞的过程,需3代以上的繁殖才能将突变性状表现出来。因此需要进行中间培养,使细胞的遗传物质复制,繁殖几代,以得到纯的变异细胞。  

(6)分离和筛选:经过中间培养,分离出大量的较纯的单个菌落,接着从几千万个菌落中筛选出性能良好的正突变菌株。常用的方法有纸片培养显色法、透明圈法、琼脂块培养法等。

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